除了两位水管工兄弟,游戏中的经典角色也在电影中亮相。碧姬公主作为蘑菇王国意志坚定的统治者,在片中对马力欧进行了严酷的作战训练,以帮助后者挖掘自身潜力。喜剧演员杰克·布莱克、塞斯·罗根则为片中的大反派酷霸,以及“搞笑担当”大猩猩咚奇刚配音。值得一提的还有,为游戏中的马力欧和路易吉兄弟配音长达三十余年的查尔斯·马丁内斯,也在片中友情客串。慕灼华(由景甜饰演)是一个聪明机智、独立自主的女孩。她不愿被父亲随意安排婚姻,决定逃离家庭束缚,参加刚刚开放给女性的科考。她带着丫鬟一起踏上了旅途。然而,在途中她偶然遇到了装病的战神王爷刘衍(由冯绍峰饰演)。起初,两人只是互相利用,但随着彼此了解和感受到对方的善良与志向,他们逐渐相知相爱。最终,他们联手保护家园,充分发挥各自的才能,取得了成功。
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